BIOFARBO

La necesidad de promover y dar visibilidad a la producción científica

Aislamiento y cultivo de bacterias sulfato reductoras acidófilas para la Producción de Sulfuro Biogénico para la precipitación de metales pesados

Los drenajes ácidos de mina (DAM) están caracterizados por acidez extrema y altas concentraciones de metales pesados y sulfatos. Las bacterias sulfato reductoras (BSR) reducen sulfatos oxidando la materia orgánica para la producción de sulfuro de hidrogeno y bicarbonato. La biorremediación consiste en la precipitación insoluble del sulfuro con los metales pesados y la alcalinización del medio por el bicarbonato. Se estudiaron muestras de lodo en condiciones acidas provenientes de la región altiplánica a través del establecimiento de columnas de Winogradsky. La zona sulfato reductora fue inoculada en condiciones anaerobias y pH 4 con distintas fuentes de carbono, entre ellas residuos agrícolas. Se establecieron 2 consorcios sulfato reductores acidófilos, capaces de ser aplicados a biorreactores para la producción de sulfuro de hidrogeno en condiciones acidas. El establecimiento de sistemas de biorremediación en dichas condiciones permitirá el tratamiento directo de drenajes ácidos de mina utilizando residuos agrícolas como materia orgánica oxidable.

The acid mine drainage (AMD) are characterized for extreme acid and high concentration of heavy metals and sulfate. Sulfate reducing bacteria (SRB) reduce sulfate oxidizing organic matter for production of hydrogen sulfide and bicarbonate. Bioremediation consist in insoluble heavy metal precipitation with sulfide and alkalinizing the environment due to the formation of bicarbonate. Several sludge samples taken from Bolivian Andean region were studied in acid conditions through the establishment of the Winogradsky column. Sulfate-reducing zone was inoculated in anaerobic conditions and pH 4 with different carbon sources, agricultural wastes among them. Two acidophilic sulphate-reducing consortia were established to be applied in bioreactors for hydrogen sulfide production in acid conditions. The establishment of bioremediation system in these conditions allows the direct treatment of acid mine drainage using agricultural wastes as oxidized matter.

Identificación de principios activos en productos comercializados como insecticidas y rodenticidas mediante cromatografía de gases acoplado a un espectrómetro de masas

En nuestro medio son comercializados plaguicidas en diferentes áreas como: jardinería, cultivos agrícolas, control de roedores; denominados como insecticidas y rodenticidas, los mismos son comercializados con los siguientes nombres comerciales: DDT, Bin Laden, Gamezan, Malation, Neocid 50%, Folidol, Baygon, Matarapido, Racumin, Zelio, El zorro, Campeon y El Demoledor. Los principios activos declarados no existen en la clasificación establecida por la Organización Mundial de la Salud, por tanto es importante identificar dichos principios activos. Se realizó la identificación de estas sustancias mediante cromatografía de gases acoplado a un espectrómetro de masas (CG-MS). Se analizaron un total de 39 muestras, tomando tres muestras de cada producto comercial. Se identificó la presencia de plaguicidas: tales como insecticidas organoclorados (lindano, endosulfan,), organofosforados (malation, clorpirifos), carbamatos (aldicarb) y un insecticida regulador del crecimiento (metopreno), determinándose que no corresponden a la formulación declarada en las etiquetas.

Pesticides were offered in the market of Bolivia which will use as: gardening, agricultural cultivation, rodent control; as insecticides and raticides. They are labeled as: DDT, Bin Laden, Gamezan, Malation, Neocid 50%, Folidol, Baygon, Matarapido, Racumin, Zelio, El zorro, Campeon y El Demoledor. Although their chemical composition is not the same of the formulation and not exist in the classification established for World Organization of the Health, is important identify these substances. Was identified of these substances by gas chromatography coupled to a mass spectrometer (CG-MS). Was analyzed three samples of each commercial product (thirteen commercial products). Was identified the following pesticides: insecticide organochlorines (lindane, endosulfan), organophosphorus (malathion, chlorpyrifos), carbamates (aldicarb) and an insect growth regulator (metoprene), that pesticides were not the same of the labeled product.

Frecuencia de Gérmenes causantes de Micosis superficiales

Las micosis superficiales representan un grupo heterogéneo de infecciones muy frecuentes a nivel mundial. Con el objeto de conocer la frecuencia de hongos productores de micosis superficiales y conformar indicadores epidemiológicos que no aproximen a la realidad local es que, en el laboratorio de Bacteriología del Hospital “Obrero” se realizó un estudio retrospectivo de muestras de pacientes ambulatorios e internos de ambos sexos con diagnostico presuntivo de dermatomicosis. La identificación de los hongos se realizó por examen microscópico y cultivo en medios selectivos. De las 426 muestras procesadas, 188 fueron positivas. De los pacientes atendidos, 97% fueron adultos, 3% niños. En relación al sexo, 57% fueron mujeres y 43% varones. Los pacientes mayormente afectados estuvieron en el grupo etáreo de 41-50 años. La frecuencia de aislamiento de los principales hongos fue la siguiente: Candida sp 37,8%, T. mentaprohytes 22,9%, T. rubrum 20,7%, M. canis 6,9%, M. furfur 4,8%, E. floccosum 3,7% y M. gypseum 3,2%. Las localizaciones mas frecuentes fueron la piel (58,5%), uñas de pies y manos 37,7% y cuero cabelludo 3,7%. Candida sp se aisló de uñas y piel; T. mentagrophytes y T. rubrum de piel, uña y cuero cabelludo respectivamente; M. canis, M. furfur y M. gypseum de piel y cuero cabelludo respectivamente; E. floccosum se aisló solo de la piel. La prevalencia de micosis fue de 0,4%, los hongos levaduriformes fueron los más prevalentes.

The superficial mycosis represents a heterogeneous unit of very frequent infections at world level. In order to know the frequency of mushrooms producing of superficial mycosis and to conform tell-tale epidemiological that don’t approach to the local reality it is that, in the lab of Bacteriology of the "Obrero" Hospital realized a retrospective study of specimens of ambulatory and interior patients of both sexes with I diagnose presumptive of dermatomicosis. The identification of the mushrooms realized per microscopic exam and I cultivate in selective means. Of the 426 procedural specimens, 188 were constructive. Of the attended patients, 97% was mature, 3% children. In relation to the sex, 57% was women and 43% males. The mostly affected patients were in the unit 41-50 year-old etáreo. The frequency of insulation of the principal mushrooms was the following one: Candida sp 37,8%,T. mentagrophytes 22,9%, T. rubrum 20,7%, M. gypsy 6,9%, M. furfur 4,8%, E. floccosum 3,7% and M. gypseum 3,2%. The localizations but you frequent they were the skin (58,5%), nails of feet and hands 37,7% and leather hairy 3,7%. Candida sp was isolated of nails and skin; T. mentagrophytes and T. rubrum, nail and hairy leather respectively; M. gypseum, M. furfur and M. gypseum and hairy leather respectively; E. floccosum was isolated alone of the skin. The mycosis prevalence was of 0,4%, the mushrooms levaduriformes were the more prevalent.

**Optimización de las Condiciones de Cultivo para la Producción de Enzimas Redox por Aspergillus niger QD y Pestalotia sp 2iQRJ**

Se evaluó la producción de enzimas REDOX en 250 cepas fúngicas del IIFB. Cualitativamente el 22% presentó actividad enzimática en medio sólido ABTS. La cepas Pestalotia sp 2iQRJ y Aspergillus níger (141QD) fueron seleccionadas por presentar mayor desarrollo de halo de oxidación de ABTS. La cuantificación se realizó por método espectrofotométrico siguiendo la oxidación enzimática de ABTS Y DMP. Las condiciones óptimas para la producción enzimática fueron: 25 ± 3ºC y pH 6. Para optimizar las condiciones de cultivo se trabajó con diseños factoriales, desarrollado en medio basal, variando las concentraciones de glucosa, extracto de levadura, peptona y CuSO4•5H2O. Aspergillus niger (141QD) presentó actividad catalasa 4 U/L (glucosa 5g/L; Extracto de levadura 1g/L), en agitación, determinada durante 10 días a 25 ± 3ºC y pH 6. Por otro lado, en la cepa Pestalotia sp 2iQRJ (14 días de cultivo), se cuantificó actividad lacasa 129 U/L (Glucosa 10 g/L; extracto de levadura 0,5 g/L; y CuSO4 9 mg/L); Manganeso peroxidasa 25 U/L (Glucosa 2,5 g/L; extracto de levadura 0.6 g/L y MnSO4 15 mg/L) donde el extracto de levadura fue altamente significativas en el incremento de actividad.

The production of REDOX enzymes was evaluated in 250 fungal strains of IIFB collection. Qualitatively 22% presented enzymatic activity on solid medium ABTS. The strands Pestalotia sp 2iQRJ and Aspergillus níger (141QD) were selected for presenting bigger development of oxidation halo with ABTS. The quantification was measured by spectrophotometric method, following the enzymatic oxidation of ABTS and DMP. For the optimization of the culture conditions we worked with factorial designs, developed in basal medium, varying the concentrations of glucose, yeast extract, peptone and CuSO4.5H2O. Aspergillus niger (141QD) presented catalase activity 4 U/L (glucose 5g/L; yeast Extract 1g/L), in shaking, during 10 days at 25 + 3ºC and pH 6. On the other hand, for the strand Pestalotia sp 2iQRJ (14 days of culture), laccase activity was quantified 129 U/L (Glucose 10 g/L; extract of yeast 0,5 g/L; and CuSO4 9 mg/L); Manganese peroxidase 25 U/L (Glucose 2,5 g/L; extract of yeast 0,5 g/L; and MnSO4 15 mg/L) where the yeast extract was highly significant in the activity increment.

**Actividad anti-Helicobacter pylori de Plantago major, Clinopodium bolivianum, Caléndula officinalis y Piper angustifolium por el método de difusión de disco**

Helicobacter pylori es una bacteria asociada a patologías gástricas como gastritis, ulceras, cáncer y linfoma de MALT. De acuerdo a estudios realizados en la ciudad de La Paz - Bolivia, aproximadamente el 50% de la población esta infectada por esta bacteria. Al ser Bolivia un país que posee una extensa flora medicinal, en el presente trabajo se seleccionaron plantas con actividad antiulcerosa y antibacteriana reportadas: Plantago major (Llantén), Clinopodium bolivianum (Khoa), Caléndula officinalis (Caléndula) y Piper angustifolium (Matico), con el propósito de evaluar la actividad anti-Helicobacter pylori de extractos orgánicos y acuosos de estas plantas. Se utilizaron extractos diclorometánico, hidroalcohólico y acuoso de las plantas en estudio para determinar su actividad inhibitoria por el método de difusión de discos en cultivo bacteriológico de cuatro cepas de Helicobacter pylori aisladas de biopsias de pacientes con patologías gástricas. La actividad de los extractos fue determinada según el diámetro del halo de inhibición. Se determinó que los extractos diclorometánico, hidroalcohólico y acuoso de Clinopodium bolivianum, Caléndula officinalis y Piper angustifolium, tienen actividad anti-Helicobacter pylori. De igual manera, el extracto hidroalcohólico de Plantago major.

Helicobacter pylori is a bacteria associated with gastric pathologies such gastritis, ulcers, cancer and MALT lymphoma. According to previous studies in La Paz - Bolivia, approximately 50 % of the population is infected with this bacterium. Bolivia is considered one of the most important countries due to its extensive medicinal plants. The present study evaluates the antibacterial activity of organic and aqueous extracts of Plantago major (Llantén), Clinopodium bolivianum (Khoa), Calendula officinalis (Calendula) and Piper angustifolium (Matico) against Helicobacter pylori. Dichloromethane-, Hydroalcoholic- and aqueous- extracts were tested using the Disk diffusion method with 4 wild-type strains of Helicobacter pylori isolated from biopsies of patients with gastric pathologies. The activity of the extracts was determined according to the diameter of the halo of inhibition. Dichloromethane, Hydroalcoholic and aqueous extracts of Clinopodium bolivianum, Calendula officinalis and Piper angustifolium were found active anti-Helicobacter pylori. Similarly, the hydroalcoholic extract of Plantago major.

Aislamiento de cepas anaeróbicas termófilas productoras de celulasas y hemicelulasas implicadas en la producción de Bioetanol mediante técnicas de cultivo y aislamiento tradicionales y no tradicionales

La problemática de los combustibles, su agotamiento y alto costo han incentivado a indagar sobre la obtención de energías alternativas como el biogás, biodiesel y bioetanol, a partir de la hidrólisis de residuos agroindustriales, contribuyendo de esta manera a la biorremediación. En el presente estudio se cultivaron bacterias anaeróbicas termófilas aisladas de aguas termales de la región altiplánica de Bolivia, mediante la técnica de Hungate modificada, cultivo bifásico (métodos tradicionales) [1],[2] y encapsulación en alginato de calcio (método no tradicional)[3]. Dos cepas cultivadas en glucosa (2B) y xilosa (FT3) fueron seleccionadas. Las actividades enzimáticas celulolítica y xilanolítica de las cepas aisladas fueron 1 y 0.9 UI/mL, y la producción de bioetanol fue de 0.25 y 0.1 g/L, respectivamente. La inmovilización de las bacterias en perlas de alginato permite el incremento de la biomasa y mayor rendimiento de producción, facilitando el uso directo en la produccion de etanol o en la purificación de enzimas de interés industrial.

The problem of fuels, their exhaustion and high cost have been considered enough reasons to investigate how to obtain an alternative energy source such as biogas, biodiesel and bioethanol, through the hydrolysis of agroindustrial residuals, contributing this way to the bioremediation. In this study were cultivate and isolated anaerobic thermophilic bacteria isolated from thermal waters of Bolivian Andean region, using Hungate modified Technique, Biphasic culture (traditional methods) and Calcium Alginate Encapsulation (non traditional method). 2B and FT3 consortia were selected by cultivation in glucose and xylose respectively. Two enzymatic activities were measured in both consortia. The cellulolytic and xylanolytic activity of consortia were 1 and 0.9 UI/mL respectively. Ethanol production was 0.25 g/L and 0.1 g/L respectively. The immobilization of bacteria in alginate beads allows the increment of biomass and high yield ethanol production. These facts facilitate the direct use in ethanol production or in purified enzymes of industrial interest.

Infección por Helicobacter pylori: Asociación a Patologías gástricas y Métodos de diagnóstico

La infección por Helicobacter pylori está distribuida a nivel mundial, la prevalencia es del 50%. Esta infección está asociada a enfermedades como las gastritis, úlceras, cáncer gástrico y linfoma de MALT. Los objetivos de este trabajo fueron: describir la relación existente entre enfermedad e infección por Helicobacter pylori, comparar la capacidad de diagnóstico de la prueba de la ureasa en relación al cultivo bacteriológico, y comparar la frecuencia de aislamiento de Helicobacter pylori en fondo gástrico en relación a antro pilórico. Se tomaron biopsias gástricas de 116 pacientes para el cultivo bacteriológico y para la identificación mediante la prueba de la urea, se registró el diagnóstico clínico de cada paciente. En el 51% de los pacientes con gastritis, 54% con úlcera, y 50% de pacientes con otras enfermedades a nivel gástrico, se observó desarrollo de Helicobacter pylori en cultivo. La prueba de la ureasa dio resultado positivo al diagnostico en el 64% de los pacientes y el cultivo dio resultado positivo en el 51% de los pacientes. El aislamiento de Helicobacter pylori de antro pilórico es del 43% y 38% de fondo gástrico. Se aisló Helicobacter pylori en el 51% de los pacientes.

The distribution of Helicobacter pylori is over worldwide, the prevalence is 50%. This infection is associated with pathologies such as gastritis, ulcers, gastric cancer and MALT lymphoma. The objectives of this study were to describe the relationship between disease and infection by Helicobacter pylori, to compare the diagnostic capability of the urease test between bacteriological culture, and compare the frequency of isolation of Helicobacter pylori in gastric fundus and pyloric antro. Gastric biopsies were taken from 116 patients for bacteriological culture and for identification the urease test, was registered clinical diagnosis of each patient. In 51% of patients with gastritis, 54% ulcer, and 50% of patients with other diseases at the stomach, it was observed development of Helicobacter pylori in culture. The urease test gave a positive result to diagnosis in 64% of patients and cultivation gave positive results in 51% of patients. The isolation of Helicobacter pylori from pyloric antro is 43% and 38% gastric fundus. Helicobacter pylori was isolated in 51% of patients.

Prevalencia de Portadores Nasales de Staphylococcus aureus en el personal de limpieza del Hospital Obrero

Staphylococcus aureus (Sa) es un agente frecuente en infecciones intrahospitalarias, se le atribuye como fuente de colonización inicial a las fosas nasales la transmisión puede ser por aerosoles y por contacto interpersonal entre el personal hospitalario y los pacientes. En el presente estudio, se determinó la prevalencia de portadores nasales de Sa en el personal de limpieza del Hospital Obrero y el perfil de sensibilidad de las cepas aisladas. Las muestras fueron recolectadas por hisopeado nasal y cultivadas en agar sangre e incubadas a 35ªC por 24-48 horas en atmósfera normal. La identificación se realizó utilizando las pruebas de: catalasa, coagulasa, manitol y novobiocina. El perfil de susceptibilidad se determinó por el método de Kirby-Bauer). La tasa de portación en los 39 trabajadores estudiados fue de 91,6% con la siguiente distribución: 100% (3/3) en el personal de limpieza de UTI, 75% (3/4) del personal de Traumatología, 100% (4/4) en el personal de Cirugía y 90% (18/36) en el personal de limpieza de otros servicios. Las 36 cepas tuvieron los siguientes porcentajes de resistencia: 97% a penicilina, 20% a trimetoprim+sulfametoxazol, 5% a eritromicina, 3% a ciprofloxacina, 2% a rifampicina, 2% a gentamicina y no hubo resistencia a oxacilina y vancomicina. La portación de Sa en el personal de limpieza es muy frecuente sin embargo la meticilino-oxacilino resistencia fue nula. El lavado escrupuloso de las manos, las medidas profilácticas, la detección de portadores y el cumplimiento de normas de bioseguridad son fundamentales para evitar la diseminación del microorganismo en el ámbito hospitalario.

Staphylococcus aureus (Sa) he is a frequent agent in infections intrahospitalarias, he is allocated as font of initial colonization to the nasal graves the transmission it can be per aerosols and per interpersonal contact between the hospital personnel staff and the patients. Presently study, the prevalencia of nasal carriers of Sa was determined in the personnel staff of cleanup of the Labor Hospital and the section of sensibility of the isolated strains. The specimens were gathered by nasal swabbing and cultivated in agar it bleeds and incubated at 35ªC by 24-48 hours in normal atmosphere. The identification realized using the tests of: catalasa, coagulasa, manitol and novobiocina. The section of susceptibility was determined by the method of Kirby-Bauer). The portación rate in the 39 studied workers was of 91,6% with the following partitioning: 100% (3/3) in the personnel staff of clean-up of UTI, 75% (3/4) of the personnel staff of Traumatology, 100% (4/4) in the personnel staff of Surgery and 90% (18/36) in the personnel staff of clean-up of other services. The 36 strains had the following submitted percentages: 97% to penicillin, 20% to cotrimoxazole, 5% to erythromycin, 3% to ciprofloxacin, 2% to rifampicin, 2% to gentamicina and there was not submitted to oxacillin and vancomycin. The portación of Sa in the personnel staff of clean-up is very frequent however the meticillin-oxacillin submitted was null. The scrupulous laundry of the hands, the measures prophylaxes, the detection of carriers and the accomplishment of bioseguridad standards are fundamental to avoid the spread of the microorganism in the hospital environment.

Actividad Genotóxica de Opuntia soehrensii, evaluada por el Test de Mutación y Recombinación Somática en D. melanogaster

El extracto acuoso de Opuntia soehrensii, planta medicinal utilizada como antiviral en la farmacopea boliviana fue evaluado en su capacidad genotóxica por el test SMART en alas de D. melanogaster. Por tratarse de un extracto entero se evaluó por dos cruces diferentes; el cruce Estándar y el cruce de Alta Bioactivación. Los resultados muestran que Opuntia soehrensii no es genotóxica en concentraciones de 3.57 mg/ml y 7.4 mg/ml para ninguno de los dos cruces, pero es promutagenica a 1.78 mg/ml.

Acuos extract from Opuntia soehrensii, it is utilized as antiviral activity in Bolivian traditional medicine, was assessed for genotoxic activity througth SMART test on D. melanogaster using two crosses: standard and high activation. The results shown Opuntia soehrensii is not genotoxic from 3.57 mg/ml to 7.4 mg/ml for both crosses, but is promutagenic at 1.78 mg/ml.

Determinación del daño genotóxico de niños en relación a las mujeres en edad reproductiva por exposición a plomo y arsénico en Alto Lima - La Paz

Muchos estudios epidemiológicos han demostrado que la exposición ocupacional o accidental al plomo está asociada con una incidencia mayor a tumores renales y cáncer de pulmón y estómago. Estudios in vivo mostraron un aumento de aberraciones cromosómicas y frecuencia de intercambio entre cromátides hermanas (ICH) en linfocitos de trabajadores expuestos a plomo, disminución de la fidelidad de la síntesis o reparación del ADN. En ese estudio se determinaron las concentraciones de plomo en sangre, frecuencia de intercambio entre cromátides hermanas (ICH), índice de proliferación celular (PRI), frecuencia de micronúcleos en células binucleadas (MNBN) e índice de división nuclear (IDN), en una población de 59 niños y 62 mujeres en edad reproductiva expuesta a metales pesados para evaluar el daño genotóxico en Alto Lima - La Paz. El análisis comparativo de las pruebas genotóxicas en los niños, mostró un incremento significativo en la frecuencia de MN (6,67 ± 2,81) en relación al aumento en la concentración de plomo en sangre (11-44 ug/dl). Se ha evidenciado que las mujeres en edad reproductiva tienen mayor frecuencia de ICH (17,24 ± 1,00) en relación a los niños 13,07 ± 0,68, y los niños tienen mayor daño clastogénico (3,63 ± 0,65) que las mujeres (2,91 ± 0,32). Estos resultados muestran una clara evidencia de que el plomo ocasiona efectos clastogénicos en los niños y las mujeres de Alto Lima expuestos a metales pesados.

Many epidemiological studies have shown that accidental or occupational exposure to lead is associated with a higher incidence of renal tumors and lung and stomach cancer. In vivo studies showed an increased frequency of chromosomal aberrations and sister chromatid exchanges (SCE) in lymphocytes of workers exposed to lead, synthesis or DNA repair fidelity decrease. In this study we determined lead concentration in blood, sister chromatid exchanges (SCE) cell proliferation index (PRI), frequency of micronuclei in binucleated cells (MNBN) and nuclear division index (IDN), in a population of 59 children and 62 reproductive age women exposed to heavy metals to assess the genotoxic damage in Alto Lima-La Paz. The comparative genotoxic analysis in children showed a significant increase in the frequency of MN (6.67 ± 2.81) in relation to the increase level of lead concentration in blood (11-44 ug / dl). The study showed that women had a higher frequency of SCE (17.24 ± 1.00) in relation to children (13.07 ± 0.68) and children have clastogenic danger (3.63 ± 0.65 ) than women (2.91 ± 0.32). These results show clear evidence that lead causes aneugenic and clastogenic effect in children and women of Alto Lima exposed to heavy metals.